將微生物冷凍，在減壓下利用升華作用除去水分，使細胞的生理活動趨于停止，從而長期維持存活狀態。
操作步驟如下：
好氧菌冷凍干燥管的制備
安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時，先用2%鹽酸浸泡過夜，自來水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性，干燥后、貼上標簽，標上菌號及時間，加入脫脂棉塞后，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。
保護劑種類要根據微生物類別選擇。配制保護劑時，應注意其濃度及pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過濾滅菌；牛奶要先脫脂，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次，每次10-30分鐘，備用。
在最適宜的培養條件下將細胞培養至靜止期或成熟期，進行純度檢查后（參見科技部自然科技資源平臺聯合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術規程》（試行）），與保護劑混合均勻，分裝。微生物培養物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜（以大腸桿菌為例，為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升，只需10毫升瓊脂斜面兩支）。采用較長的毛細滴管，直接滴入安瓿管底部，注意不要濺污上部管壁，每管分裝量約0.1-0.2毫升，若是球形安瓿管，裝量為半個球部。若是液體培養的微生物，應離心去除培養基，然后將培養物與保護劑混勻，再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短，最好在1-2小時內分裝完畢并預凍。分裝時應注意在無菌條件下操作。
一般預凍2小時以上，溫度達到-20℃到-35℃左右。
采用冷凍干燥機進行冷凍干燥。
將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內，開始冷凍干燥，時間一般為8-20小時。
將安瓿管頸部用強火焰拉細，然后采用真空泵抽真空，在真空條件下將安瓿管頸部加熱熔封。熔封后的干燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度。
安瓿管應低溫避光保藏。
冷凍干燥后抽取若干支安瓿管進行各項指標檢查，如存活率、生產能力、形態變異、雜菌污染等。
厭氧菌冷凍干燥管的制備
主要程序與需氧菌操作相同，注意保護劑的選擇和準備，保護劑使用前應在100℃的沸水中煮沸15分鐘左右，脫氣后放入冷水中急冷，除掉保護劑中的溶解氧。復蘇方法
先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，
將安瓿管頂部燒熱，
用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，
用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養。
四環福瑞科儀科技發展（北京）有限公司法人由原北京四環科學儀器廠有限公司技術研發和管理負責人擔任，是為客戶提供專業真空冷凍干燥設備及解 決方案的服務供應商。我們秉承“以客戶為中心，追求最高的客戶滿意度”的 服務理念，個性服務、創新設計、高效處理、可靠保障，可根據用戶需求提供和設計單個或多個符合GMP相關標準的凍干設備配套系統，如負壓和無菌隔離器、自動進出料及外置CIP等系統。
我們以共贏發展為本，技術服務為根，在臻于完善中與眾不同，在持續發展中追求卓越。
